Filmemacher Alek Keshishian und sein Team begleiten Madonna auf ihrer spektakulären «Blond Ambition Tour», der skandalumwitterten Tournee im Jahr 1990. Weil die Sängerin auf der Bühne zu «Like a Virgin» eine Masturbation simulierte, wurde ihr Konzert in Italien durch den Vatikan verboten, und die Polizei in Toronto plante, Madonna wegen Erregung öffentlichen Ärgernisses zu verhaften.
Anhand von Konzertausschnitten und intimen Einblicken backstage versucht der Film, sich dem Phänomen Madonna anzunähern. «In Bed With Madonna» wurde bei jungen Schwulen zu Kult, weil sie zum ersten Mal auf der Leinwand einen Kuss zwischen zwei Männern – zwei von Madonnas Tänzern – sahen.
Siehe auch «Strike a Pose», der die Geschichte von sechs ihrer damaligen Performer erzählt, sowie «Desperately Seeking Susan».